基于PI3K/AKT信号通路探讨GNB4对结直肠癌细胞生物学行为的影响
The effect of GNB4 on the biological behavior of colorectal cancer cells based on the PI3K/AKT signaling pathway
摘要目的:分析结直肠癌(CRC)中鸟嘌呤核苷酸结合蛋白亚单位β4(GNB4)表达水平及其对临床预后的影响,探讨GNB4在CRC细胞恶性生物学行为中的作用及其分子机制.方法:从GEO数据库下载CRC的转录数据,收集2016年2月至2017年2月台州市第一人民医院收治的100例CRC患者,研究GNB4在CRC癌组织和正常组织中的表达差异;利用Kaplan-Meier分析GNB4表达与CRC患者总生存期的关系.采用RT-qPCR和免疫组化方法验证CRC组织及其癌旁组织中GNB4的表达水平及与患者总生存期的相关性.以CRC细胞系DLD-1为实验对象,采用CCK-8增殖实验、Transwell侵袭实验和划痕愈合实验、Western blot探讨GNB4对CRC细胞增殖、侵袭、转移生物学行为及PI3K/AKT信号通路的影响.利用P13K/AKT通路激活剂740Y-P处理GNB4敲低细胞系并检测细胞生物学行为的变化.结果:GNB4 mRNA在GEO数据集、本中心的CRC组织的相对表达量均高于癌旁正常组织(P<0.05).生存分析结果显示,GNB4高表达与CRC患者的总生存期及无远处转移生存率密切相关(P<0.05);多因素回归分析表明GNB4(HR=5.013,95%CI=1.556~16.152,P=0.007)是CRC患者独立的预后因素.敲低GNB4的表达能明显抑制CRC细胞株DLD-1的增殖、侵袭、迁移(P<0.05);与空白对照组相比,si-GNB4组细胞中p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT的比值明显降低(P<0.05),而P13K/AKT通路激活剂740Y-P能逆转敲低GNB4对细胞的作用(P<0.05).结论:GNB4可以通过PI3K/AKT信号通路促进DLD-1细胞迁移与侵袭,进而影响CRC患者的预后.
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