早期人胚神经干细胞分布及分离培养

A morphological and distributive study of neural stem cells in human embryonic brain and culture of human embyonic neural stem cells in vitro

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摘要目的研究发育早期人胚脑神经干细胞的形态特征及其分布情况,并观察其体外生长分化特性.方法计划生育流产的6～12周胚胎大脑组织切片用vimentin抗体进行免疫组织化学染色,光镜观察.机械分离皮质细胞,用无血清培养基和含血清培养基进行悬浮和贴壁培养,分别用MAP2、GFAP及Gal C抗体进行免疫细胞化学染色,鉴定干细胞和神经元、星形胶质细胞及少突胶质细胞.结果发育早期大脑Vimentin阳性细胞分布广泛,细胞形态单一,多呈圆球形,体积较小.体外培养的大脑皮质细胞在培养的第5～7天时,形成较多克隆,可多次传代;贴壁培养时细胞发生分化,分别为MAP2 、GFAP、Gal C阳性的神经元、星形胶质细胞及少突胶质细胞.结论胚胎发育早期大脑神经干细胞分布广泛,形态单一,皮质Vimentin阳性细胞数量多,便于分离,是最佳神经干细胞分离部位;人NSCs可以在体外增殖并发生多向分化.