换一批
换一批抗人CD3单链抗体四聚体基因在HeLa细胞中的表达和活性鉴定
Expression of tetramerized single chain Fv antibody gene specific for human CD3 molecule in HeLa cells and identification of binding affinity
摘要目的将抗人CD3单链抗体(scFv)/人p53四聚功能域融合基因转染到HeLa细胞,进行真核表达和活性测定.方法将抗人CD3 scFv /人p53四聚功能域融合基因克隆入真核分泌表达载体pSecTag2-B中,转染HeLa细胞进行表达,表达产物纯化后利用流式细胞仪进行活性测定.结果表达产物经SDS-PAGE和Western blot证实,为Mr约35 000的特异蛋白条带.纯化后经流式细胞仪检测,可特异性地结合人外周血单个核细胞(PBMCs),亲和力高于scFv.结论获得了可与PBMCs特异性结合的抗人CD3 scFv四聚体,为进一步临床应用奠定了基础.
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