摘要目的 利用基因工程方法克隆SD大鼠Atoh1 cDNA编码序列并测定分析其克隆序列.方法 采用非对称互补引物/模板法,制备Atoh1 cDNA的编码序列,将其克隆人PMD-19T载体中并测序.结果 经酶切鉴定、测序分析表明,扩增得到的大鼠Atoh1基因CDS区全长为1 056 bp,编码351个氨基酸;测定序列与GenBank中公布的参考序列对比,有2处碱基发生突变,但克隆序列编码的氨基酸序列与参考序列完全一致.这两处碱基应为单核苷酸多态性(SNP)位点,突变为无义突变,不影响蛋白的表达.结论 成功克隆了Atoh1 cDNA编码序列,为进一步对感音神经性耳聋的基因治疗奠定了基础.
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