换一批
换一批重组质粒pEGFP-N1-Twist的构建、表达及其对SKOV3细胞克隆形成能力的影响
Construction of recombinant pEGFP-N1-Twist plasmid and its stable expression in SKOV3 cells
摘要目的 构建含有Twist基因的重组质粒pEGFP-N1-Twist,为进一步研究上皮性卵巢癌的发生及转移机制奠定基础.方法 生物合成Twist cDNA基因序列,定向克隆至pEGFP-N1表达载体内,将pEGFP-N1-Twist转染入SKOV3细胞系,用Real-time PCR和Western blot检测Twist基因的表达情况;通过克隆形成实验检测pEGFP-N1-Twist对SKOV3细胞的作用.结果 Twist基因的cDNA已克隆到真核细胞表达载体pEGFP-N1中,将pEGFP-N1-Twist转染入SKOV3细胞后,Twist基因/蛋白的表达明显上调,转染组较对照组克隆形成明显增加(P＜0.05).结论 成功构建了Twist基因的真核表达载体并能在细胞内稳定表达,Twist基因能增强SKOV3细胞的克隆形成能力.
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关键词
重组质粒Twist基因卵巢癌真核表达载体pEGFP-N1基因克隆recombinant plasmidTwist geneovary cancereukaryotic expression vector of pEGFP-N1gene cloning
分类号
R711.75
栏目名称
DOI
10.7652/jdyxb201404006
发布时间
2014-08-19
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