S100A6 siRNA的构建及鉴定

Construction and identification of S100A6-siRNA

二维码有效期 120s

摘要目的利用小片段干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制S100A6蛋白的表达,为研究CacyBP/SIP核转位机制提供有利的工具.方法设计S100A6的siRNA序列,用脂质体LipofectamineTM 2000将siRNA转染至人结肠癌SW480细胞中,在荧光显微镜下观察转染效率,用Real-time PCR及Western blot方法检测S100A6在人结肠癌SW480细胞内的mRNA和蛋白表达.结果构建了3对S100A6-siRNA,荧光显微镜下检测转染人结肠癌SW480细胞成功;RT-PCR证明了在SW480细胞内S100A6的mRNA表达显著降低(P＜0.05);Western blot证明了SW480细胞内S100A6蛋白表达显著降低(P＜0.05);与S100A6 si-1、S100A6 si-3组相比,S100A6si-2组对S100A6的mRNA和蛋白抑制效果最明显(P＜0.05).结论成功构建了S100A6-siRNA,为CacyBP/SIP核转位机制研究提供了有利的工具.

作者冯珊珊 ^[1] 杨博 ^[2] 刘爱琴 ^[2] 武婧 ^[2] 翟惠虹 ^[2] 学术成果认领

作者单位宁夏医科大学总医院外科学研究室,宁夏银川,750004 ^[1] 宁夏医科大学总医院消化内科,宁夏银川,750004 ^[2]

关键词结肠癌 S100A6 siRNA 钙周期素结合蛋白 colon cancer S100A6 siRNA CacyBP/SIP

主题词蛋白(Egg White)结肠肿瘤(Colonic Neoplasms)细胞(Cells)钙(Calcium)周期性(Periodicity)

分类号 R57

栏目名称 技术方法研究

DOI 10.7652/jdyxb201605028

发布时间 2016-10-26

基金项目

国家自然科学基金资助项目 宁夏自然科学基金资助项目 宁夏医科大学重点资助项目(No.XZ201413) Supported by the National Natural Science Foundation of China the Natural Science Foundation of Ningxia the Key Research Funds of Ningxia Medical University