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柴胡皂甙d对人肝癌细胞BECN 1表达及自噬功能的影响

The effects of saikosaponin-d on the expression of human hepatocellular carcinoma cell BECN1 and autophagic function

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摘要目的：观察柴胡皂甙 d(SSd)对肝癌细胞 SMMC-7721生长增殖及自噬作用的影响,初步探讨其可能的机制。方法肝癌 SMMC-7721细胞株经不同终浓度 SSd(5.0、7.5、10.0、12.5、15.0、和17.5 mg/L)作用24、48、72 h,MTT法检测细胞增殖,筛选最适作用浓度及时间,RT-PCR 测定自噬基因 BECN1 mRNA 表达水平,Western blot 检测BECN1蛋白表达水平。结果 SMMC-7721细胞增殖的抑制率随着SSd浓度的增大而增大,浓度达12.5 mg/L时,抑制率最高(60%)；SSd作用后BECN1在基因和蛋白水平的相对表达量比对照组明显升高(P<0.05),3-甲基腺嘌呤(3-MA)可降低BECN1基因和蛋白的表达,并可降低 SSd作用后的BECN1的表达。结论 SSd对肝癌细胞 SMMC-7721增殖的抑制作用呈现浓度和时间的依赖性,基本符合药物剂量-效应关系。SSd 可能通过上调自噬基因 BECN1的表达诱导自噬性死亡的发生,从而达到抑制肝癌细胞 SMMC-7721增殖的作用。