聚羟基丙烯酸和Van-clear在qRT-PCR法检测非小细胞肺癌EGFR基因突变中的应用研究

Application of polyhydroxy acrylic acid and Van-clear in the detection of EGFRgene mutations in non small-cell lung cancer by qRT-PCR method

二维码有效期 120s

摘要目的比较环保固定液聚羟基丙烯酸、环保透明脱蜡液Van-clear单独或联合替代传统固定液4％中性缓冲甲醛、传统透明脱蜡液二甲苯应用于实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法,检测非小细胞肺癌(NSCLC)表皮生长因子受体(EGFR)基因突变率的敏感性、特异性及符合率的差异,评估qRT-PCR法及其环保技术平台的临床应用价值.方法选取中山市博爱医院、中山市中医院2013年5月至2016年3月期间手术切除的原发性NSCLC标本91例,同一肿瘤病变部位切取5个样本,采用随机数字表法分为A、B、C、D、E.A组使用4％中性缓冲甲醛固定、二甲苯透明脱蜡制作切片、直接测序法检测EGFR基因突变;B组使用4％中性缓冲甲醛固定、二甲苯透明脱蜡制作切片、qRT-PCR法检测EGFR基因突变;C组使用聚羟基丙烯酸固定、二甲苯透明脱蜡制作切片、qRT-PCR法检测EGFR基因突变;D组使用4％中性缓冲甲醛固定、Van-clear透明脱蜡制作切片、qRT-PCR法检测EGFR基因突变;E组使用聚羟基丙烯酸固定、Van-clear透明脱蜡制作切片、qRT-PCR法检测EGFR基因突变.分别测定5组NSCLC中EGFR基因第18、19、20、21号外显子的突变情况.结果 ①B、C、D、E组与A组比较,EGFR基因发生突变人数百分率、基因靶位点突变率的差异均无统计学意义(P>0.05);②B、C、D、E组与A组比较,EGFR靶位点突变检测结果的灵敏度好、特异度强、符合率高.结论聚羟基丙烯酸、环保透明脱蜡液Van-clear单独或联合替代传统试剂,应用于qRT-PCR法检测NSCLC中EGFR基因突变,与以传统试剂应用于直接测序法的检测结果一致性好,有在临床推广应用的意义和价值.

作者陈志强 ^[1] 王莹 ^[1] 叶才果 ^[2] 米贤军 ^[1] 陈昂 ^[1] 毕超 ^[3] 刘超凡 ^[1] 徐秀梅 ^[1] 段立锋 ^[1] 官燕飞 ^[1] 邓文同 ^[1] 代新珍 ^[1] 学术成果认领

作者单位南方医科大学附属中山博爱医院病理科,广东中山,528400 ^[1] 广东医科大学广东省医学分子诊断重点实验室,广东东莞,523808 ^[2] 广州中医药大学附属中山医院病理科,广东中山,528401 ^[3]

关键词聚羟基丙烯酸环保透明脱蜡液Van-clear 非小细胞肺癌基因表皮生长因子受体实时荧光定量PCR EGFR酪氨酸激酶抑制剂 polyhydroxy acrylic acid environment-friendly transparent dewaxing solution Van-clear non-small-cell lung cancer gene epidermal growth factor receptor quantitative real-time polymerase chain reaction EGFR tyrosine kinase inhibitor

主题词基因(Genes)突变(Mutation)癌, 非小细胞肺(Carcinoma, Non-Small-Cell Lung)荧光(Fluorescence)受体, 表皮生长因子(Receptor, Epidermal Growth Factor)

分类号 R361 R734.2

栏目名称 技术方法研究

DOI 10.7652/jdyxb201705028

发布时间 2017-09-27

基金项目

国家自然科学基金资助项目 广东省医学科学技术研究基金项目 广东省中山市卫生和计划生育局医学科研立项课题(No.2014J128) Supported by the National Natural Science Foundation of China the Project Funded by Guangdong Medical Research Foundation the Medical Scienceand Research Project of Zhongshan Municipal Health and Family Planning Bureau