摘要目的 探索酰基辅酶A合成酶长链家族成员3(ACSL3)m6A修饰抑制铁死亡在非小细胞肺癌顺铂耐药中的作用及机制.方法 在体外培养的人肺腺癌耐顺铂株A549/DDP细胞中,分别通过感染ACSL3短发夹RNA慢病毒载体、转染Wilms肿瘤1相关蛋白(WTAP)小干扰RNA(siRNA)质粒、或共转染WTAP siRNA质粒与ACSL3过表达质粒并进行干预.处理48 h后,更换含1 μg/mL顺铂的完全培养基继续培养24 h.ACSL3短发夹RNA慢病毒载体感染的A549(或A549/DDP)细胞接种至裸鼠背部皮下以构建皮下荷瘤模型.免疫荧光染色检测顺铂处理(或正常培养)的A549和A549/DDP细胞的ACSL3蛋白表达,细胞克隆形成实验检测细胞顺铂敏感性,铁橙(FerroOrange)染色和总铁离子检测试剂盒检测细胞或组织中铁离子含量.BODIPY 581/591 C11染色检测细胞脂质过氧化水平.MeRIP-qPCR实验检测ACSL3的m6A甲基化修饰.RNA衰变实验检测细胞中ACSL3的mRNA稳定性.qRT-PCR和Western blotting分别检测ACSL3和WTAP的mRNA和蛋白表达.免疫组化检测铁蛋白(Ferritin)及COX2的表达.结果 顺铂处理后,ACSL3在A549/DDP细胞中蛋白表达的下降幅度[(48.70±3.81)％]显著低于A549细胞[(65.62±2.53)％].ACSL3敲低显著降低A549/DDP细胞克隆能力,增强了FerroOrange染色强度、总铁离子和脂质过氧化物水平(P＜0.05).顺铂处理后A549/DDP细胞的ACSL3 m6A修饰水平降低,且其下降幅度显著低于A549细胞(P＜0.05).WTAP敲低显著增强ACSL3衰减速率,降低ACSL3 m6A富集率.与仅敲低WTAP的A549/DDP细胞相比,同时敲低si-WTAP并过表达ACSL3的细胞克隆能力显著升高,Fe2+含量、总铁离子水平、脂质过氧化水平均降低.裸鼠皮下荷瘤实验证实,ACSL3敲低可上调荷瘤组织COX2水平、Ferritin水平、铁离子和活性氧水平,并抑制移植瘤生长.结论 WTAP通过介导ACSL3 mRNA的m6A修饰抑制铁死亡,降低A549细胞的顺铂敏感性,进而调控肺癌的进展.