换一批
换一批摘要[目的]研究苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)晚期表达因子lef-10在宿主细胞Sf9中的时空表达及定位,为进一步研究lef-10的功能提供理论基础.[方法]利用不同的特异引物,通过PCR方法扩增lef-10及innateP-lef-10目的片段,将目的片段分别克隆到载体pTriEx-SP-GFP上,得到重组质粒pTriEx-lefl0-GFP和pTriEx-innateP-lef10-GFP,经过双酶切检测构建载体.将重组质粒分别与Bacmid共转染Sf9细胞,用得到的重组病毒分别于4,8,16,24,36 h再次感染宿主细胞;用激光共聚焦显微镜观察lef-10的表达及亚细胞定位情况.[结果]在感染早期,lef-10就已开始表达;随感染时间的推移,lef-10逐渐移动至细胞核,且在晚期和极晚期时相,lef-10主要集中于细胞核中.[结论]在天然条件下,lef-10是作为晚期表达因子发挥功能的,并且对其他基因的转录可能起一定的调控作用.
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