换一批红花种子cDNA文库构建及脂肪酸代谢相关基因的克隆
Construction of safflower cDNA library and clone of fatty acid metabolism genes
摘要[目的]构建红花种子eDNA文库,挖掘红花脂肪酸代谢途径相关基因,为红花品质改良的基因工程研究奠定基础.[方法]以红花成熟种子为材料,通过Trizol法,提取红花种子总RNA,使用GeneRacer@Kit和CloneMinerⅡcDNA Library Construction Kit试剂盒构建cDNA文库.并对cDNA文库的重组率和插入片段进行鉴定,从中获得contig和singlet片段及脂肪酸代谢相关基因,通过荧光定量PCR,测定delt-12脂肪酸脱氢酶基因在不同开花时期(14,16,18,20 d)红花种子中的表达量.[结果]构建的红花种子cDNA文库总克隆数为7.5×10 6,重组率＞95％,插入片段长度均＞500 bp,全长基因比例达到20％.从红花cDNA文库中共拼接得到contig 543条,sin-glet 3 444条.delt-12脂肪酸脱氢酶基因序列在成熟红花种子中的表达量较其他时期高.[结论]成功建立了红花种子cDNA文库,克隆了delt-12脂肪酸脱氢酶基因,且该基因表达量在红花种子成熟过程中逐渐升高.
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DOI
10.13207/j.cnki.jnwafu.2015.11.029
发布时间
2016-05-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家教育部博士点基金-青年教师基金项目（(20122223120002)）
长春市科技局项目（(2014077)）
吉林省教育厅项目（(201458/2015190)）
2014,2015年大学生创新创业项目（(201410193037)）
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