表皮葡萄球菌8-32-B株aap基因domain B的原核表达

Prokaryotic Expression of Domain B in aap Gene of Staphylococcus epidermidis Strain 8-32-B

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摘要为获得表皮葡萄球菌aap基因domain B片段的原核表达产物,采用PCR方法扩增引起新疆南疆地区奶牛乳房炎的表皮葡萄球菌株aap基因domain B片段,并克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,构建重组质粒pET-32a(+)-aap,将重组质粒转化至宿主菌Ecoli BL21中诱导表达.结果表明,克隆得到aap基因domain B片段为2 316 bp,Aap蛋白分子质量184.5 ku.在宿主菌E.coli BL21中表达的最佳诱导时间为4h,IPTG最佳诱导浓度为0.75 mmol/L;纯化时洗杂缓冲液中咪唑浓度为40 mmol/L,洗脱缓冲液中咪唑浓度为200 mmol/L时可以获得单一Aap蛋白.

作者李英 ^[1] 陈伟 ^[1] 学术成果认领

作者单位塔里木大学生命科学学院,新疆兵团塔里木盆地生物资源保护利用重点实验室,新疆阿拉尔 843300 ^[1]

关键词表皮葡萄球菌 aap 原核表达 Staphylococcus epidermidis aap gene Prokaryotic expression

分类号 Q78

DOI 10.7606/j.issn.1004-1389.2016.11.020

发布时间 2016-12-27

基金项目

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