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GCA2基因在白念珠菌致病和耐药中的作用

The role of GCA2 gene in the pathogenicity and drug resistance of Candida albicans

摘要侵袭性真菌感染严重威胁人类生命健康.白念珠菌是临床侵袭性真菌感染中较为常见的菌种之一.白念珠菌生存于葡萄糖有限但含其他替代碳源的环境中,吸收利用不同碳源的能力对其环境适应性和致病性起着关键作用.葡萄糖淀粉酶是一种外切葡聚糖酶,它与碳水化合物代谢有关.课题组通过文献调研发现,白念珠菌中编码细胞外葡萄糖淀粉酶的基因GCA2,可以将单一碳源的多糖转变为低聚糖.但GCA2基因在白念珠菌致病和耐药中的作用还未知.本课题首先基于营养缺陷型筛选标记HIS1/LEU2,采用同源重组方法构建了 GCA2基因缺失白念珠菌,通过生长实验、菌丝形成实验、葡萄糖淀粉酶分解实验、透射电镜考察了 GCA2基因对白念珠菌致病相关表型的影响,随后又通过药敏实验、生长实验、时间-杀菌曲线实验考察了 GCA2基因对白念珠菌耐药性的作用.结果显示GCA2基因缺失白念珠菌的生长曲线、在液态和固态培养基上的菌丝形成能力与亲本菌相比无明显差异,但是其葡萄糖淀粉酶分泌减少,细胞形态呈现偏椭圆形,且粒径较亲本菌有明显增大;药敏实验显示GCA2基因缺失白念珠菌对氟康唑的敏感性增强(48 h,MIC=2 μg/mL),亲本菌的MIC>64 μg/mL,通过生长和时间-杀菌曲线实验进一步证实该结果.因此,GCA2基因在白念珠菌的形态、葡萄糖淀粉酶分泌能力以及对氟康唑的敏感性发挥了作用,对其进一步深入研究有望为阐明白念珠菌致病和耐药的分子机制奠定基础.

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