动态检测血管紧张素Ⅱ刺激后STAT3信号核转位及其与衰老的关系
Dynamic Observation of the Nucleus Translocation of STAT3 in Senescent Cells Stimulated with Angiotension Ⅱ
摘要为了动态观察复制性衰老细胞中血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)激活人信号转导与转录活化因子3(hSTAT3)信号转导途径的核转位情况及该途径在细胞衰老过程中的变化.将载体pMSl hSTAT3上的目的基因STAT3序列亚克隆到pEGFP-C3报告载体中,构建出pEGFP-hSTAT3质粒选择人胚肺二倍体成纤维细胞WI-38细胞株进行细胞培养,通过脂质体(Effectene)转染的方法,将pEGFP-STAT3质粒分别转染至19代,42代WI-38细胞中;在激光共聚焦显微镜下动态观察血管紧张素Ⅱ激活STAT3的核转位的变化及不同代数的差别.结果显示Ang Ⅱ刺激细胞后,出现活化的STAT3在胞核内聚集现象,并且在19代细胞中15分钟开始出现,30-45分钟左右时达到高峰;42代细胞中30分钟左右开始出现,50-60分钟左右达到高峰.因此我们认为Ang Ⅱ刺激WI 38细胞,能出现hSTAT3信号转导的核内集聚现象;并且随着WI-38细胞传代数的增加,STAT3信号转导入核时间延迟.说明随着细胞的复制性衰老,通过STAT3通路转导的信号活性逐渐降低,最终影响细胞的增殖,可能是促进细胞衰老的原因之一.
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