SV40 TAg转基因小鼠模型的建立及其表达
Generation of Simian Virus 40 Large T Antigen Gene Transgenic Mice and Its Expression
摘要为了建立中枢神经系统肿瘤小鼠模型,构建了大鼠神经元特异性烯醇化酶(rat neuron-specific enolase,NSE)基因启动子调控下的猿猴病毒40大T抗原基因(simian virus 40 large Tantigen gene,SV40 TAg)转基因载体,通过受精卵雄原核显微注射的方法制备转基因小鼠.PCR鉴定转基因小鼠的基因型;RT-PCR和Northern印迹检测转基因阳性鼠中SV40 TAg RNA水平的表达及其组织特异性;免疫组化检测其蛋白质水平的表达.经显微注射共获得9只首代转基因阳性鼠(首建者,Founder小鼠),其中2例出生时即发生神经干细胞来源的肿瘤,其他Founder小鼠经繁育后共建立了5个SV40 TAg转基因小鼠系,其中有4个系检测到SV40 TAg RNA水平的表达且特异性地表达于脑组织,但未检测到蛋白质水平的表达.研究表明NSE启动子活性具有较强的组织特异性,并起始于小鼠胚胎发育期;SV40 TAg具有明显的致癌作用,且SV40 TAg诱发的神经系统肿瘤易造成转基因小鼠早期死亡.
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