换一批人源抗丙型肝炎病毒噬菌体抗体库的构建及筛选
Construction and screening of human hepatitis C virus-specific phage antibody combinatorial library
摘要目的构建人丙型肝炎病毒(HCV)特异性噬菌体抗体库,制备人源抗HCV单克隆抗体(mAb).方法用常规RT PCR法,直接从5例丙型肝炎患者外周血混合淋巴细胞中,扩增抗体重链Fd基因和κ轻链基因,与噬菌体载体pComb3连接,构建噬菌体抗体Fab库.对抗体库进行5轮吸附-洗脱-扩增的亲和选择后,以ELISA法鉴定抗HCV噬菌体抗体.结果RT PCR可有效地扩增出Fd和κ基因,并以此构建成容量为1.2×107的噬菌体抗体库.经5轮亲和选择可使特异性噬菌体抗体得到高度富集,抗HCV噬菌体抗体阳性克隆达96%.结论抗HCV噬菌体抗体库的构建和人源抗HCVmAb的制备,为HCV感染的诊断、治疗和发病机制的研究提供有效的分子工具.
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医学主题词
细菌噬菌体(Bacteriophages)抗体(Antibodies)人(Persons)肝炎病毒属(Hepacivirus)抗体, 单克隆(Antibodies, Monoclonal)
栏目名称
DOI
10.3321/j.issn:1007-8738.2000.03.002
发布时间
2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
江苏省科技发展计划（BJ97070）
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