应用噬菌体肽文库筛选mAb F3特异性结合肽
Phage-displayed peptides mimicking the neutralizing site of hantaan virus envelope glycoprotein
摘要目的应用噬菌体展示肽文库筛选可与汉坦病毒囊膜蛋白中和性单抗(mAb) F3特异性结合的配体肽. 方法以F3 mAb为筛选配基, 对噬菌体展示的随机12肽文库进行3轮生物亲和淘选; 用夹心ELISA和竞争ELISA鉴定筛选克隆的结合特性, 并进一步对阳性克隆进行序列测定和分析.结果通过3轮生物淘选, 能被抗体捕获的噬菌体克隆为21/22. ELISA测定显示, 筛选到的噬菌体短肽能与F3 mAb特异性结合. 序列分析表明, 7个阳性克隆氨基酸序列相同, 均为-MHGPTKNQMWHT; 同源性分析显示, 该序列与HTNV/SEOV M蛋白G2区第750~759位氨基酸有较高的同源性.结论本研究为基于表位水平的HFRSV特异性分子多肽疫苗的设计提供了重要的依据.
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