换一批摘要目的: 克隆幽门螺杆菌 Hp ureB基因,并构建其核酸疫苗.方法: 以 Hp NCTC11637株基因组DNA为模板, 用PCR扩增ureB基因,并亚克隆至pMD18-T载体中.将目的基因经 Sal I、Bgl Ⅱ酶切纯化后插入pTCAE中, 转化 E.coli DH5α.经 Sal I、Xho I酶切并测序鉴定的阳性重组质粒命名为pT-ureB.以电穿孔法将pT ureB转染CHO细胞, 用Western blot检测UreB蛋白的表达.结果: 克隆重组后得到pT-ureB.将pT-ureB以电穿孔法转染CHO细胞后, 取其培养上清进行Western blot检测,在UreB的相对分子质量( M r)为 62 000 处出现特异性条带.结论: 成功地构建了 Hp ureB核酸疫苗.体外转染CHO细胞后,经Western blot检测证实有UreB蛋白的表达,为进一步的相关研究奠定了基础.
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DOI
10.3321/j.issn:1007-8738.2005.06.001
发布时间
2005-12-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家高技术研究发展计划（863计划）（2001AA215161）
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