换一批
换一批摘要目的: 构建人源性Fab噬菌体抗体库, 为进一步从抗体库中筛选人源性抗GPIIb/IIIa Fab抗体奠定基础.方法: 利用RT-PCR和噬菌体表面展示技术, 直接从血小板膜糖蛋白抗体(抗-GPIIb/IIIa)阳性的特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者脾细胞中提取总RNA, 逆转录合成cDNA, 扩增抗体轻链和重链Fd基因.经Sac I/Xba I和Xho I/Spe I双酶切, 依次将PCR产物插入噬粒载体pComb3H相应位点, 电转化大肠杆菌XL1-blue, 以辅助噬菌体VCSM13进行超感染, 构建成人源性Fab噬菌体抗体库.结果: 成功地构建库容量达6.2×106的抗血小板膜糖蛋白GPIIb/IIIa Fab噬菌体抗体库.结论: 构建了人源性Fab抗体库, 并达到建库标准, 可进一步从中筛选人源性Fab 抗体.
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