换一批
换一批人精子蛋白17单克隆抗体的制备及特性鉴定
Preparation and characterization of the monoclonal antibody against human sp-erm protein 17
摘要目的:制备抗精子蛋白17(Sp17)的单克隆抗体(mAb)并鉴定其特性.方法:克隆人Sp17 cDNA,表达带有6-His标记的重组Sp17,用纯化的重组Sp17免疫BALB/c小鼠制备mAb.用ELISA筛选抗体阳性的细胞克隆.用免疫组化染色法及阻断试验鉴定mAb的特异性.结果:获得2株杂交瘤细胞系3C12和3D6,其分泌的mAb的Ig亚类(型)分别为IgG1和IgM(κ),杂交瘤细胞培养上清的ELISA效价分别为1∶ 64和1∶ 32;腹水mAb的效价分别为1∶ 1×105和1∶ 5×104.用人和大鼠睾丸组织以及人精液精子免疫组化染色及阻断试验证明,抗Sp17 mAb具有良好的特异性.抗Sp17 mAb也可识别卵巢癌组织中异常表达的Sp17.结论:成功地制备特异性的抗Sp17 mAb,为研究该蛋白的功能、天然分布及异常表达奠定了基础.
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