换一批
换一批摘要目的:构建小鼠cdc25B蛋白特定序列的原核表达载体,并诱导表达谷胱甘肽巯基转移酶(GST)融合蛋白.方法:采用PCR方法从小鼠cdc25B野生型及位点突变型蛋白编码序列中扩增出约360个碱基的片段,构建原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导后进行融合蛋白表达.Western blot鉴定表达产物.结果:构建出带有GST标签的原核表达载体,在大肠杆菌BL21中表达出相对分子质量(Mr)为40000的重组蛋白质,经Western blot鉴定,可与GST单克隆抗体结合,发生特异性反应.结论:利用原核表达系统成功表达出小鼠cdc25B蛋白特定序列的蛋白质,为进一步探讨与其他蛋白相互作用提供了基础.
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主题词
小鼠(Mice)美国疾病控治中心(Centers for Disease Control and Prevention (U.S.))蛋白(Egg White)方法(Methods)大肠杆菌(Escherichia coli)
分类号
Q132.7
栏目名称
技术方法
DOI
10.3321/j.issn:1007-8738.2007.11.022
发布时间
2007-12-24
基金项目
国家自然科学基金
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