换一批
换一批鸡卵黄抗体的制备以及金磁微粒为载体去除人血浆部分高丰度蛋白的研究
Preparation of hen egg yolk immunoglobulin and partial plasma high abundant protein depletion by prepared chicken immunoglobulin coupled on GoldMag carrier
摘要目的:以人血浆白蛋白(HSA)和IgG为免疫原,制备特异性鸡卵黄抗体IgY(Egg yolk immunoglobulin),并将其固定于金磁微粒表面,用于HSA和IgG的去除研究.方法:用HSA、IgG以及混合成分分别作免疫原免疫Roman母鸡.制备抗HSA和IgG鸡卵黄抗体IgY,并对IgY的分离提取条件进行优化.SDS-PAGE和间接ELISA检测IgY的纯度和效价.将高效价IgY固定于金磁颗粒表面进行血浆高丰度蛋白去除研究.结果:免疫后60～120 d内,鸡血清抗体效价可达1∶15 000～1∶25 000;收获鸡蛋,提取得到的卵黄抗体IgY效价可达1∶10000～1∶25000,纯度98%以上;采用金磁微粒载体固定IgY,可对血浆中的HSA,IgG进行特异性的去除.结论:人血浆中的高丰度蛋白成分HSA和IgG免疫产蛋母鸡后,可从鸡卵黄中分离提取到高效价、高纯度的卵黄抗体IgY;IgY偶联于金磁微粒表面可特异性的去除人血浆中的HSA和IgG,作为血浆蛋白质组学研究的一种新方法,有较好的应用前景.
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