摘要目的:建立自体热休克凋亡肺癌细胞抗原制备、树突状细胞(DC)体外诱导、以及抗原负载方法, 为制备DC肿瘤疫苗提供技术基础.方法:采用酶消化法从手术切除的肺癌新鲜组织获得单细胞悬液, 热休克后用白桦脂酸诱导其凋亡制备成细胞抗原;采用血细胞分离机采集外周血单个核细胞(PBMC), 贴壁法获得单核细胞, 经GM-CSF与IL- 4体外诱导成未成熟树突状细胞(imDC);负载细胞抗原后制备成DC肿瘤疫苗, 并对DC疫苗的形态、数量及表型特征进行分析.结果:(1)肿瘤细胞抗原得率:(13.68±1.30)×106/g组织;平均凋亡率:(93.79±2.31)%;(2)imDC平均得率为(9.37±0.83)×106/(118.77±12.56)×106个PBMC, 活率>95%;imDC表型分析:CD11c+CD14-、 CD11c+HLA-DR+、 CD11c+CD80+、 CD11c+CD83+、 CD11c+CD86+ 表达率分别为(87.45±3.42)%、 (87.16±1.08)%、 (2.80±1.52)%、 (5.64±1.56)%、 (5.11±1.09)%;(3)DC疫苗平均得率为(5.75±0.69)×106/(9.37±0.83)×106个imDC, 活率>95%, DC疫苗表型:CD11c+CD14-、 CD11c+HLA-DR+、 CD11c+CD80+、 CD11c+CD83+、 CD11c+CD86+ 表达率分别为(92.73±1.21)%、 (89.35±2.31)%、 (86.80±1.23)%、 (69.53±7.21)%、 (94.92±1.48)%. 结论:该方法稳定、安全、可靠, 可制备出具有成熟DC表型的肿瘤疫苗.