换一批
换一批摘要目的: 构建人类核糖核酸酶9 (human ribonuclease 9,hRNase 9) 的重组表达载体方法: 从成年人附睾组织提取了总RNA,通过RT-PCR扩增了hRNase 9编码成熟肽的基因片段,将其克隆入载体pET25b(+)的Nde I和EcoR I位点之间,构建了重组表达载体pET25b (+)-hRNase 9,并通过PCR法、限制性内切酶消化法和DNA序列测定加以证实,以IPTG 诱导重组载体转化宿主菌E.coli BL21(DE3)表达重组hRNase 9蛋白结果: 重组载体pET25b (+)-hRNase 9构建成功,SDS-PAGE显示重组载体转化宿主菌E.coli BL21(DE3)表达了Mr约为21 000的重组hRNase 9 蛋白结论: 成功的扩增了hRNase 9编码成熟肽的基因片段,构建了重组表达载体pET25b (+)-hRNase 9,为下一步研究奠定了基础
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