苦荞过敏原TBa表位区段的表达及免疫活性分析
Expression and immunological characterization of the epitopes in tartary buckwheat allergen
摘要目的:确定苦养过敏原(TBa)的主要表位区段.方法:以TBa cDNA为模板,利用PCR方法,构建TBa的4个表位区段(E12、E3、E6、E36)的重组原核表达载体,转入大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达.经Ni2+-NTA亲和纯化后,SDS-PAGE分析.采用间接和竞争ELISA以及点杂交技术进行免疫活性测定.结果:获得了纯度较高的TBa重组表位蛋白(E12、E3、E6、E36).与先前获得表位E1、E2的免疫活性比较表明,重组表位蛋白与荞麦过敏症患者血清均有IgE结合活性,其中E1的活性最强.结论:E1可能是苦养过敏蛋白TBa中最重要的抗原结合区域之一.
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