换一批抗人LOC339524单克隆抗体的制备和应用
Preparation and application of monoclonal antibody against human LOC339524 protein
摘要目的 制备特异性抗人LOC339524的单克隆抗体(mAb)并进行应用.方法 将LOC339524蛋白的非糖基化抗原序列的编码基因进行三段重复表达,合成的基因克隆到质粒pET28a上.采用大肠杆菌表达系统获得LOC339524重组蛋白,以此作为免疫原免疫BALB/c小鼠,获得mAb.ELISA测定抗体特异性及效价.Western blot法鉴定LOC339524重组蛋白、免疫组织化学技术分别检测人心肌组织和H9C2细胞中LOC339524蛋白的表达,采用制备的抗体检测不同心脏病患者血清LOC339524水平.结果 筛选出2株能稳定分泌抗人LOC339524蛋白mAb的杂交瘤细胞株,5-D3和4-F8.其中5-D3效价高于4-F8,达2×106.Westem blot法、免疫组织化学技术证明5-D3能特异性识别人和大鼠LOC339524蛋白,应用制备的抗体可成功检测不同心脏病患者血清LOC339524的水平.结论 成功制备了特异性好、效价高的抗人LOC339524蛋白mAb.
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医学主题词
抗体, 单克隆(Antibodies, Monoclonal)人(Persons)蛋白(Egg White)抗原(Antigens)敏感性与特异性(Sensitivity and Specificity)
栏目名称
发布时间
2016-01-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
重庆市自然科学基金（2013C292）
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