敲低dachshund同源物1(DACH1)促进Capan-1胰腺癌细胞凋亡并抑制其侵袭和迁移
Knockdown of dachshund homolog 1 (DACH1) promotes cell apoptosis and inhibits the invasion and migration abilities of Capan-1 pancreatic cancer cells
摘要目的 探讨抑制dachshund同源物1(DACH1)的表达对Capan-1胰腺癌细胞周期、凋亡、迁移及侵袭的影响.方法 设计合成针对人DACH1基因的4条小干扰RNA (siRNA),退火形成双链短发夹RNA(shRNA),插入pGenesil-1载体中,构建成重组质粒,进行酶切及测序鉴定,通过脂质体介导转染入Capan-1细胞,利用荧光显微镜、反转录PCR和Western blot法检测其转染表达效率.藻红蛋白标记的膜联蛋白Ⅴ和7-氨基放线菌素D(annexin Ⅴ-PE/7AAD)双标记结合流式细胞术检测Capan-1细胞凋亡和流式细胞术检测细胞周期,TranswellTM侵袭、迁移实验()测Capan-1细胞侵袭迁移能力.结果 成功构建并筛选出干扰质粒pshRNA-DACH1,将其转染Capan-1胰腺癌细胞后,成功下调Capan-1细胞DACH1水平,同时细胞凋亡明显增加,而对细胞周期无明显影响.下调DACH1表达后细胞侵袭和迁移能力均降低.结论 敲低DACH1基因表达能显著促进胰腺癌细胞Capan-1凋亡,抑制其侵袭及迁移.
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