换一批
换一批HIV-1CRF01_AE重组型gp120 V1/V2结构域单克隆抗体的制备与鉴定
Preparation and characterization of monoclonal antibody against gp120 V1/V2 domain of HIV-1 subtype CRF01_AE
摘要目的 真核表达人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1) CRF01_AE重组型gp120蛋白的V1/V2结构域,制备其单克隆抗体并鉴定其抗原反应性.方法 构建pTriEx-3-V1/V2CNE55真核表达载体,在HEK293F细胞中表达V1/V2-His融合蛋白,纯化后作为抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫后的小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,ELISA筛选分泌抗V1/V2重组蛋白单克隆抗体的阳性杂交瘤,对单克隆抗体的特异性、型别以及效价进行鉴定.结果 制备并获得一株稳定分泌抗HIV-1 AE亚型V1/V2结构域单克隆抗体的杂交瘤细胞株,ELISA测定腹水效价高达1:81 000,单克隆抗体类型属于IgG1/κ型.Western blot结果表明该单克隆抗体同样能够识别不同亚型的HIV gp120蛋白.结论 成功制备出抗HIV-1 AE重组型gp120蛋白V1/V2结构域的单克隆抗体.
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关键词
人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)gp120可变区1/2单克隆抗体真核蛋白表达疫苗human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1)gp120 variable region 1 and 2 domainmonoclonal antibodyeukaryotic protein expression systemvaccine
栏目名称
发布时间
2017-06-02
基金项目
国家重点研发计划（2016YFC1201000）；
国家科技重大专项（2016ZX10001005003）；
江苏省产学研项目（BY2015069-02）；
常州市卫生计生委青年科技项目（QN201505）；
常州市武进区科技项目（WS201402）；
2015年度江苏省“双创博士”计划（2016CZBJ060）；
常州市高层次卫生人才培养计划
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