应用短肽阵列筛选哮喘患儿血清粉尘螨变应原特异性IgE抗体的结合表位

Screening of specific IgE-binding epitopes of dust mite allergens using short peptide array

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摘要目的筛选粉尘螨(Derf)主要和中等效价变应原(Der f1、Der f2、Der f4、Der f5和Der f7)可能具有的线性表位.方法根据Der f1、Der f2、Der f4、Der f5和Derf7活性部位氨基酸序列,各合成含8个氨基酸的短肽,相互之间重叠7个氨基酸,将这些短肽点到芯片上构建微阵列,将此微阵列芯片与人血清IgE进行免疫标记反应,扫描芯片并分析数据.结果合成了5组变应原共1128个短肽,并构建微阵列芯片.将6份对粉尘螨过敏的儿童血清混合并加样到微阵列芯片上,进行扫描和数据分析,最终得到Der f1的4个表位(第46 ～53位氨基酸、第71 ～78位氨基酸、第99 ～110位氨基酸和第179 ～ 186位氨基酸),Der f2的3个表位(第15 ～22位氨基酸、第80 ～89位氨基酸和第106～ 113位氨基酸),Derf4的6个表位(第69 ～82位氨基酸、第107～116位氨基酸、第225 ～232位氨基酸、第261 ～268位氨基酸、第355 ～365位氨基酸和第483 ～496位氨基酸),Der f5的1个表位(第102 ～ 109位氨基酸)和Derf7的3个表位(第32 ～39位氨基酸,第52 ～64位氨基酸和第100 ～107位氨基酸).结论确定了粉尘螨变应原Der f1、Der f2、Der f4、Der f5和Der f7线性表位.