换一批
换一批摘要目的 探究长链非编码RNA透明质酸合成酶2反义转录本1(lncRNA HAS2-AS1)基因对口腔鳞癌细胞自噬性死亡和氧化应激的影响.方法 采用RNA干扰技术沉默CAL-27人口腔鳞癌细胞HAS2-AS1基因,应用实时荧光定量PCR检测HAS2-AS1的表达,Western blot法检测微管相关蛋白1轻链3B Ⅰ(LC3B Ⅰ)、LC3BⅡ、自噬相关基因7(ATG7)、P62、胱天蛋白酶3(caspase-3)、裂解型caspase-3(c-caspase-3)、caspase-9、c-caspase-9,B细胞淋巴瘤因子2(Bc12)、Bc12相关X蛋白(BAX)表达,免疫荧光细胞化学染色法检测细胞LC3B的表达,二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)负载检测细胞活性氧(ROS)的含量,流式细胞术检测细胞凋亡,试剂盒法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量.结果 敲低HAS2-AS1后,促进CAL-27细胞凋亡,提高细胞LC3B Ⅱ/LC3B Ⅰ、c-caspase-9/caspase-9、c-caspase-3/caspase-3、BAX/Bc12 比值以及 ATG7、LC3B、MDA 及 ROS 水平,降低 P62 和 SOD水平.结论 敲低HAS2-AS1增加细胞氧化应激促进口腔鳞癌细胞发生自噬性死亡.
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