M2型巨噬细胞抑制CD8+T细胞促进食管癌细胞恶性生物行为
M2 macrophages inhibit CD8+T cells and facilitate the malignant biological behavior of esophageal cancer cells
摘要目的 探讨M2型巨噬细胞通过抑制CD8+T细胞的抗肿瘤能力参与食管癌的恶性生物学行为的作用.方法 利用佛波酯(PMA)联合白细胞介素4(IL-4)/IL-13将人单核细胞白血病细胞(THP-1)诱导为M2型巨噬细胞并用实时定量PCR检测相关炎性因子.运用磁珠分选法分选健康志愿者外周血CD8+T细胞,用流式细胞术验证分选纯度.构建CD8+T细胞与食管鳞癌细胞的非接触性共培养体系(CD8+T细胞),和构建M2型巨噬细胞、CD8+T细胞与食管鳞癌细胞的非接触性共培养体系(M2型巨噬细胞联合CD8+T细胞).平板克隆实验和CCK-8细胞毒性实验检测各组肿瘤细胞增殖能力.TranswellTM实验检测各组肿瘤细胞侵袭和迁移能力.流式细胞术检测并分析各组肿瘤细胞的凋亡情况.运用GraphPadPrism9.5软件进行统计学分析和制图.结果 诱导后巨噬细胞IL-10和精氨酸酶1(Arg1)表达上调,IL-12和肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达下降,具有M2表型巨噬细胞特征.磁珠分选法成功的分选出CD8+T细胞,其阳性率>90%.食管鳞癌细胞与CD8+T细胞非接触性共培养组的增殖、侵袭、迁移和抗凋亡能力显著低于单独癌细胞组;而食管鳞癌细胞与M2型巨噬细胞条件培养基预处理CD8+T细胞共培养后,其增殖、侵袭、迁移和抗凋亡能力与食管鳞癌和CD8+T细胞共培养组相比显著增强.结论 M2型巨噬细胞通过抑制CD8+T细胞的抗肿瘤能力促进食管鳞癌细胞的增殖、侵袭、迁移和抗凋亡.
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