miR-449a下调TGIF2抑制甲状腺癌细胞CAL-62恶性增殖的研究
Study of miR-449a down-regulating TGIF2 and inhibiting the malignant proliferation of thyroid cancer cell CAL-62
摘要目的 探讨 miR-449a靶向TGIF2 对甲状腺癌细胞 CAL-62 恶性增殖、氧化应激和上皮间质转化(EMT)的调控作用.方法 以甲状腺癌细胞 CAL-62 作为研究对象.分为对照组、miR-449a mimic 组、pcDNA-TGIF2 组、miR-449a mimic+ pcDNA-TGIF2 共转染组.采用 RT-qPCR检测细胞中 miR-449a和 TGIF2 表达;TargetScan软件与双荧光素酶报告实验验证二者靶向关系;CCK8 检测细胞活力;Brdu 染色检测细胞增殖;试剂盒检测氧化应激标记物SOD和 MDA含量;DCF染色检测 ROS含量;Western blot 检测 EMT 标记分子 E-cadherin,N-cadherin 和 Fibronectin的蛋白表达.结果 TGIF2 在 CAL-62 细胞中表达较高,与对照组相比,pcDNA-TGIF2 转染组 BrdU 阳性细胞数目和百分率显著增加,SOD含量显著升高而MDA和ROS含量显著降低,同时N-cadherin和Fibronectin表达显著上升而E-cadherin表达显著下降(均P<0.05).在 miR-449a mimic+pcDNA-TGIF2 共转染组中上述现象被有效缓解和逆转.结论 miR-449a过表达可通过靶向TGIF2 抑制甲状腺癌细胞CAL-62 恶性增殖,加剧其氧化应激和上皮间质转换.
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