恩格列净通过调控AMPK/eNOS信号通路改善ox-LDL诱导的内皮祖细胞功能障碍

Empagliflozin protects ox-LDL-induced mouse endothelial progenitor cells injury via AMPK/eNOS signaling pathway

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摘要目的研究恩格列净(EMP)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导内皮祖细胞(EPCs)损伤的保护作用及机制.方法通过密度梯度离心法提取、分离并培养小鼠骨髓来源的的EPCs.采用Dil标记乙酰化低密度脂蛋白(Dil-ac-LDL)联合FITC标记荆豆凝集素-1(FITC-UEA-1)双摄取法鉴定.将EPCs分为正常对照组,ox-LDL组以及ox-LDL联合不同浓度恩格列净实验组.CCK-8检测细胞活力,Transwell检测细胞迁移,FITC-Annexin V/PI检测细胞凋亡,ELISA检测细胞上清液中血管内皮细胞生长因子(VEGF)、基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)含量;流式细胞术检测一氧化氮(NO)的合成情况.Western blot检测AMPK、p-AMPK、eNOS、p-eNOS的蛋白表达.结果提取的EPCs诱导培养至第7天经鉴定为小鼠骨髓EPCs.与对照组比较,ox-LDL组细胞活力降低,迁移细胞减少,凋亡增加,VEGF、SDF-1α含量降低,NO合成减少(P＜0.05);与ox-LDL组相比,不同浓度恩格列净组细胞活力有所提高,迁移细胞增多,凋亡减少,VEGF、SDF-1α含量升高,NO合成增加(P＜0.05).ox-LDL处理可明显抑制AMPK及eNOS磷酸化(P＜0.05),恩格列净处理可以改善AMPK及eNOS磷酸化水平(P＜0.05),而AMPK抑制剂Compound C可使恩格列净改善EPCs功能活性的作用受到明显的抑制(P＜0.05).结论恩格列净可改善ox-LDL诱导的EPCs功能障碍,其机制与调控AMPK/eNOS信号通路有关.