BAFF对免疫性血小板减少症模型小鼠的氧化应激和炎症反应的调控机制
Study on the regulatory mechanism of BAFF on oxidative stress and inflammatory response in a mouse model of immune thrombocytopenia
摘要目的 探讨B细胞激活因子(BAFF)对免疫性血小板减少症模型小鼠的氧化应激和炎症反应的影响和潜在机制.方法 制备豚鼠抗小鼠血小板抗血清(GP-APS),并将50只无特定病原级别的成年雄性BALB/c小鼠(7~8周龄)分为对照组(空白对照)、ITP组(GP-APS诱导)、ITP+rhBAFF组(ITP组联合静脉注射50 μg/kg/50 μL重组人BAFF 蛋白)、ITP+rhBAFF+shDll1(100 μg/kg)组和 ITP+rhBAFF+shJagged1(2 5 μg/kg)组[构建了沉默 Dll1 的重组腺病毒载体(shDll1)和沉默Jagged1的重组腺病毒载体(shJagged1),在ITP+rhBAFF组的基础上静脉注射腺病毒载体,每日1次,注射1周],每组10只.1周后取小鼠外周血,并分离单个核细胞和血清.对外周血中的血小板进行计数.用酶联免疫吸附法(ELSIA)检测小鼠外周血血清中BAFF、Dll1、Jagged1、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)的水平.皮尔森相关性分析法分析外周血血清中BAFF分别与Dll1和Jagged1的相关性.Western blot检测小鼠外周血单个核细胞中BAFF、D111、Jagged1的蛋白表达.结果 与对照组相比,ITP组小鼠的外周血血小板数目降低(P<0.05).ITP小鼠外周血血小板数与BAFF的水平呈显著负相关(r=-0.5687;P=0.0338,95%CI:-0.8445~-0.05464);外周血血小板数与Dll1的水平呈显著负相关(r=-0.6361;P=0.0145,95%CI:-0.8723~-0.1592);外周血血小板数与Jagged1的水平呈显著负相关(r=-0.6409;P=0.0135,95%CI:-0.8742~-0.1672).ITP小鼠外周血中BAFF的水平与Dll1呈显著正相关(r=0.5794;P=0.0236,95%CI:0.09544~0.8418).BAFF的水平与Jagged1的水平呈显著性正相关(r=0.5723;P=0.0258,95%CI:0.08489~0.8387).与对照组比较,ITP 组外周血中 BAFF、Dll1、Jagged1、IL-1β、IL-6、TNF-α、ROS、MDA水平上调,GSH-PX、SOD水平下调(均P<0.05).与ITP组比较,ITP+rhBAFF组外周血中BAFF、Dll1、Jagged1、IL-1β、IL-6、TNF-α、ROS、MDA 水平上调,血小板数目减少,GSH-PX、SOD 水平下调(均 P<0.05).与 ITP+rhBAFF 组比较,ITP+rhBAFF+shDll1 组外周血中 Dll1、Jagged1、IL-1β、IL-6、TNF-α、ROS、MDA 水平下调,血小板数目增多,GSH-PX、SOD水平上调(均P<0.05).与ITP+rhBAFF组比较,ITP+rhBAFF+shJagged1组外周血中Jagged1、IL-1β、IL-6、TNF-α、ROS、MDA水平下调,血小板数目增多,GSH-PX、SOD水平上调(均P<0.05).结论 BAFF通过激活Dll1/Jagged1信号通路促进免疫性血小板减少症模型小鼠的氧化应激和炎症反应.
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