CCL2中和性抗体对皮肤/肌肉切口牵拉模型大鼠机械性痛觉过敏及巨噬细胞功能的影响
Effect of CCL2-neutralizing antibodies on mechanical nociceptive sensitization and macrophage function in a skin/muscle incision retraction model in rats
摘要目的 探究CCL2中和性抗体对皮肤/肌肉切口牵拉(SMIR)模型大鼠疼痛行为的影响,并研究其可能的作用机制.方法 32只SPF级SD大鼠分为假手术组、SMIR模型组、SMIR+IgG组和SMIR+CCL2中和性抗体组,每组8只.通过行为学测试评估各组大鼠的痛觉敏感性;采用RT-qPCR或免疫印迹检测背根神经节(DRG)中M1和M2型巨噬细胞标志物水平;通过糖酵解实验评估巨噬细胞代谢能力.结果 与假手术组相比,SMIR模型组大鼠术后患足的50%机械撤足阈值(MWT)降低(P<0.05),缩足持续时间明显延长(P<0.05),而应用CCL2中和性抗体能够改善这些行为学异常(P<0.05).各组间热缩足潜伏期比较差异无统计学意义(P>0.05).与假手术组相比,SMIR模型组大鼠的炎症相关基因CD80、iNOS和IL-12水平升高(P<0.05),同时,抗炎基因CD206、Arg1和IL-10水平明显降低(P<0.05);CCL2中和性抗体干预后,这些基因表达的异常变化均减弱(P<0.05).另外,与假手术组相比,SMIR模型组巨噬细胞糖酵解代谢活性增强,其细胞外酸化率(ECAR)、ATP生成、葡萄糖摄取量及乳酸生成量均有明显升高(P<0.05);CCL2中和性抗体干预后,这些代谢指标降低(P<0.05).结论 CCL2中和性抗体能有效缓解SMIR模型大鼠的机械性痛觉过敏,同时降低巨噬细胞糖酵解代谢活性,并调节炎症相关基因的表达.
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