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基于PI3K/Akt/mTOR通路探究七氟醚麻醉对大鼠神经细胞凋亡的影响

Effect of sevoflurane anesthesia on neuronal apoptosis in rats based on PI3K/Akt/mTOR pathway

摘要目的 探讨七氟醚麻醉对大鼠认知功能及神经细胞凋亡的影响.方法 取96只大鼠,随机分为对照组(吸入2L·min-1氧气)、七氟醚低浓度组(吸入体积分数为1%的七氟醚+2L·min-1氧气)、七氟醚中浓度组(吸入体积分数为2%的七氟醚+2L·min-l氧气)、七氟醚高浓度组(吸入体积分数为4%的七氟醚+2L·min-1氧气),持续吸入6h.用Morris水迷宫实验观察各组大鼠认知能力,用HE染色观察海马组织学形态,用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定海马组织中枢神经特异性蛋白(soluble protein 100β,S-100β)、神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平,流式细胞术测定神经细胞凋亡情况,蛋白印迹法(Western blotting)测定海马组织 B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关 X蛋白(Bcl2-associated X protein,Bax)、磷酸化磷脂酰肌醇 3-激酶(phosphorylated phosphatidylinositol 3-kinase,p-PI3K)、磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶(phosphorylated serine/threonine kinase,p-Akt)和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphorylated mammalian target of rapamycin,p-mTOR)的水平.结果 HE染色结果表明,对照组海马组织神经细胞结构正常,排列紧密,七氟醚各浓度组大鼠海马组织神经细胞减少,排列紊乱,分布不均匀.与对照组比较,七氟醚各浓度组大鼠逃避潜伏期时间,S100-β、NSE、IL-1β、TNF-α水平,Bax蛋白水平和神经细胞凋亡率均升高,穿越平台次数,平台停留时间,Bcl-2、p-PI3K、p-Akt和p-mTOR蛋白水平均降低(P<0.05);七氟醚各浓度组诸项指数水平变化规律相同,并呈剂量依赖性(P<0.05).结论 七氟醚麻醉可诱导大鼠神经细胞凋亡,使大鼠认知能力衰退,其可能与调控PI3K/Akt/mTOR信号通路有关.

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