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十字花科植物线粒体DNA的提取和纯化

Extraction and Purification of mtDNA in Crucifer

摘要以十字花科植物芸芥(Eruca sativa)、白菜型油菜(Brassica rapa)和甘蓝型油菜(Brassica napus): 武39-1、武43-1、武50-2为试材,在蔗糖衬垫法分离纯化mtDNA方法优点的基础上,通过4组不同离心力配比,采用差速离心法、改变缓冲液A的成分以及增加缓冲液的用量,建立了一种简便提取十字花科植物mtDNA方法.研究结果表明:分离细胞破碎组织的离心力、分离线粒体的离心力以及纯化线粒体时的离心力分别为1 000 g、20 000 g、18 000 g时可分离到高产量的线粒体,且在缓冲液A(蔗糖0.5 mol·L-1,Tris-Cl 50 mmol·L-1,EDTA 5 mmol·L-1,BSA 0.1%,PVP 0.5%,0.1% β-巯基乙醇,pH=7.5)中加入0.5%PVP可提高mtDNA的产量,经DNA电泳检测、RAPD扩增证明此方法得到的mtDNA可完全达到RAPD标记和其它分子生物学研究的要求.

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分类号 Q949.748.3Q523
栏目名称 研究报告
DOI 10.3321/j.issn:1000-4025.2005.06.013
发布时间 2005-07-28
基金项目
甘肃省自然科学基金
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西北植物学报

西北植物学报

2005年25卷6期

1137-1142页

ISTICPKUCSCDCABP

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