枣ZjMADS1-box基因克隆与表达分析

Cloning and Expression Analysis of ZjMADS1-box Gene Related to Floral Organ Development in Chinese Jujube (Ziziphus jujuba Mill.)

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摘要以‘金丝4号’枣花蕾和叶片为材料,通过抑制消减杂交文库(SSH文库)的构建、RACE技术和半定量RTPCR等方法,克隆了枣花发育基因并研究了其时空表达模式,为枣花发育机理研究奠定基础.结果表明:(1)从枣花SSH文库中鉴定出476 bp的花发育B类PISTILLATA(PI)基因的EST序列,命名为ZjMADS1-box；通过RACE技术获得了枣ZjMADS1-box基因的全长cDNA序列.(2)枣ZjMADS1-box基因表现出PI基因的序列结构特征.其全长cDNA长度为957 bp,编码220个氨基酸残基；在氨基酸序列水平上,该基因与巨桉EgM2(Eucalyptus grandis M2)和白千层MqPI(Melaleuca quinquenervia PI)的相似性最高为72.6％,与辣椒CaPI(Capsicum annuum PI)的相似性最低为61.8％；系统进化树分析显示,枣ZjMADS1-box与MqPI和EgM2基因聚在一起；枣ZjMADS1-box基因编码蛋白的等电点为9.75,分子量为25 587.5 Da,属亲水性的非分泌性蛋白.(3)Zj-MADS1-box基因在花器官中特异表达,在嫩茎、成熟叶、腋芽等营养器官中不表达；在4月30日和5月8日花蕾中的表达量略高于5月4日、5月12日、5月16日的表达量,但差异不显著.