荔枝古树胚性愈伤组织LcCu/Zn-SOD3基因启动子的克隆及功能验证
Cloning and Functional Analysis of LcCu/Zn-SOD3 Promoter from Embryogenic Callus of the Ancient Litchi Tree
摘要以荔枝古树“宋荔”胚性愈伤组织为材料,采用接头染色体步移法,分离获得LcCu/Zn-SOD3启动子片段长度为1 426 bp,命名为ProLcCSD3(GenBank登录号:KF672186.1).生物信息学分析表明,该启动子含有多个逆境应答元件、激素应答元件、胚乳特异表达元件,且可能受WRKY和MYB等转录因子调控.通过双酶切方法,以ProLcCSD3替换载体pCAMBIA1301上的CaMv35S启动子,构建了重组质粒p1301-proLcCSD3-GUS,并成功转化农杆菌EHA105和GV3101.注射烟草的瞬时表达分析表明,该启动子片段可以驱动下游报告基因表达.转化拟南芥分析表明,该启动子驱动的下游GUS可以在拟南芥的根、茎、叶中表达,且可响应NaC1、PEG-6000、ABA、MeJA和损伤等非生物胁迫.研究表明,荔枝古树LcCu/ Zn-SOD3可能参与多种非生物胁迫应答和激素信号转导途径.
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