鸭儿芹羟基肉桂酸转移酶基因的克隆及其对不同温度的响应

Isolation and Expression of Shikimate/Quinate Hydroxycinnamoyltransferase Gene under Different Temperatures in Cryptotaenia japonica Hassk

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摘要以贵州省野生鸭儿芹为研究对象,用RT-PCR克隆获得与木质素合成有关的羟基肉桂酸转移酶基因(CjHCT),并分析CjHCT基因对不同温度的响应,探索人工栽培鸭儿芹的适宜温度.结果表明:(1)CjHCT基因开放阅读框长度为1 290 bp,编码429个氨基酸;蛋白质分子质量为47.58 kD,等电点为6.67;进化树分析表明,CjHCT与茄科植物的HCT亲缘关系最近.(2)荧光定量PCR分析显示,CjHCT基因在贵州鸭儿芹根、叶柄、叶及花不同组织中的表达具有组织特异性,且在根中Cj HCT基因的表达量最高,而在叶中表达量最低,花与叶中该基因表达量相近.(3)对鸭儿芹生长过程中主要面临的4种不同温度(10℃、18℃、30℃和38℃)分别处理0、0.5、1、2、4、8、12、24 h,荧光定量PCR检测显示,Cj HCT基因的表达量(以0h处理作为对照,表达量为1)在高温(30℃和38℃)处理下于0.5h时最高,其中30℃处理的CjHCT基因表达量高于38℃处理;在低温(10℃和18℃)下鸭儿芹CjHCT基因表达量于12h时最高,其中10℃处理0.5h时Cj HCT基因较对照表现为下调;高温(30℃和38℃)下CjHCT基因表达量峰值比低温(10℃和18℃)下表达量峰值高,而且峰值出现的时间也较早.该实验意义在于初步研究发现低温栽培鸭儿芹能抑制CjHCT基因的表达,为人工栽培鸭儿芹温度调控提供了参考.