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百脉根小G蛋白Rac1基因的克隆与功能分析

Functions of Small GTPase Rac1 in Nodulation Process in Lotus japonicus

摘要小G蛋白Rop在植物细胞信号转导中发挥着重要的分子开关功能.该实验通过RT-PCR方法克隆了百脉根的一个Rop编码基因LjRac1,并对LjRac1基因序列进行生物信息学分析,然后采用半定量RT-PCR检测LjRac1基因在百脉根不同组织中的表达,用荧光实时定量PCR方法检测百脉根接种根瘤菌后LjRac1基因在不同阶段根系中的表达,构建过表达重组质粒,利用发根农杆菌介导的遗传转化法对LjRac1基因功能进行分析.结果表明:(1)序列分析显示,LjRac1完整编码区的cDNA序列长度为594 bp,编码197个氨基酸,其编码蛋白具有典型的Rop家族保守结构域;同源分析显示.百脉根LjRac1与大豆GmRac1、野大豆GsRac1的一致性最高(94.42%).(2)LjRac1基因在百脉根的根、茎、叶、根瘤和花中均有表达,且在根和根瘤中的表达水平较高;接种根瘤菌0.5h后,LjRac1基因在根系中的表达量呈显著升高趋势.(3)过表达转基因植株中LjRac1 mRNA的表达水平为对照植株的14.3倍,且过表达植株的结瘤数目较对照明显增加.研究认为,LjRac1基因是一个受根瘤菌诱导增强表达的基因,过表达LjRac1基因可以引起植株结瘤数目的增加,说明LjRac1基因可能参与早期结瘤信号转导途径,从而在根瘤的发育中发挥一定作用.

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分类号 Q785Q786
栏目名称 研究报告
DOI 10.7606/j.issn.1000-4025.2015.12.2365
发布时间 2016-04-12
基金项目
国家自然科学基金青年基金项目 信阳师范学院青年科研基金项目 信阳师范学院青年骨干教师资助计划项目 信阳师范学院“南湖学者奖励计划”青年项目
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西北植物学报

西北植物学报

2015年35卷12期

2365-2372页

ISTICPKUCSCDCABP

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