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枸杞 WRKY3基因克隆及组织表达分析

Cloning and Tissue Expression Analysis of WRKY3 Gene in Lycium barbarum L .

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摘要以枸杞为材料，采用 PCR 及 RACE 方法，克隆了枸杞 WRKY 转录因子基因 cDNA 序列，命名为Lb WRKY3，GenBank登录号为 KX196192。在生物信息学分析的基础上，进行亚细胞定位、基因表达分析。结果显示：（1）Lb WRKY3开放阅读框ORF长度为1068 bp ，编码356个氨基酸。（2）生物信息学分析显示，Lb WRKY3编码蛋白具有一个 WRKY 结构域，二级结构中不规则卷曲结构所占比例最大（58．67％），延伸链结构次之（18．88％），α螺旋比例为15．82％，β转角最少，仅为6．63％；Lb WRKY3蛋白与案头菊 WRKY 蛋白、黄花蒿WRKY蛋白相似性较高。（3）亚细胞定位显示，Lb WRKY3蛋白定位于细胞核。（4）实时定量 PCR分析表明， Lb WRKY3在根中表达量最高，在花中表达量最低；在枸杞果实发育过程中 Lb WRKY3均有表达，表达量随果实成熟逐渐升高，并于35 d达到峰值；Lb WRKY3基因在果实中的表达具有组织特异性表达特性（果肉＞果皮＞种子）。研究表明，Lb WRKY3基因参与了枸杞果实生长发育调控。