换一批
换一批沙漠小球藻的蛋白双向电泳分析
Analysis of Two-dimensional Electrophoresis Protocol For Desert Chlorella(Chlorella sp .TLD6B) Proteome
摘要为建立适用于小球藻（Chlorella sp ．TLD6B）蛋白质组分析的双向电泳体系，该研究比较了 TCA／丙酮沉淀法和Trisol提取法对小球藻蛋白的提取效果，不同pH梯度IPG胶条（pH3～10和 pH4～7）、不同蛋白质上样量、不同聚焦程序对小球藻蛋白的分离效果。结果表明：（1）采用Trisol提取法可获得较高纯度蛋白，当选择24 cm pH 3～10的线性IPG胶条时，上样量为500μg ，聚焦80000 Vh效果最佳，可分辨蛋白点达726个；当选择24 cm pH 4～7的线性IPG胶条时，上样量为1000μg ，聚焦80000 Vh效果最佳，可分辨蛋白点达1230个。（2）该实验随机挑选了10个胶内蛋白点进行MALDI‐TOF／TOF‐MS鉴定分析表明，其中8个蛋白点鉴定成功，进一步说明T risol提取法可适用于小球藻双向电泳分析。
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