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茶树谷丙转氨酶基因的克隆及其表达分析

Cloning and Expression Analysis of the Gene Encoding Alanine Aminotransferase in Camellia sinensis

二维码有效期 120s

摘要该研究基于茶树的转录组数据，采用RT‐PCR方法从茶树‘黄金芽’cDNA中克隆获得茶树谷丙转氨酶基因（CsA laA T），利用荧光定量PCR方法，对 CsA laA T在茶树材料‘迎霜’和‘黄金芽’不同组织、温度胁迫与激素处理的表达进行分析。结果显示：CsA laA T基因开放阅读框长度为1662 bp ，编码553个氨基酸，含有天冬氨酸转氨酶家族（Aspartate aminotransferase family ）典型的AAT‐like保守结构域。多序列比对显示，该序列与多个相关物种的序列一致性达78．83％，与磷酸吡哆醛（PL P ）结合的10个氨基酸残基以及第358位赖氨酸催化位点在物种间高度保守。茶树CsAlaAT蛋白属亲水性蛋白，相对分子质量为60877．5 D ，等电点为6．11，碱性、酸性、脂肪族和芳香族氨基酸比例分别为12％、11％、22％和8％，无序化特征不明显，与大麦 HvAlaAT具有相似的三维结构。实时定量PCR分析表明，CsA laA T在茶树‘迎霜’和‘黄金芽’中的表达均具有组织特异性，且均在根部的表达量最高；CsA laA T响应高温（38℃）和低温（4℃）胁迫的表达上调；外源施用脱落酸（ABA ）和赤霉素（GA ）能够抑制茶树中CsA laA T基因的表达。