换一批
换一批摘要该试验采用RT-PCR和RACE技术,对龙眼多糖合成的关键基因尿苷二磷酸-葡萄糖6-脱氢酶基因(DlUGD6)进行分离克隆、生物信息学分析和亚细胞定位研究,并采用qRT-PCR技术,对其在龙眼体细胞胚胎发生、合子胚发育及不同组织器官中的表达模式进行分析.结果表明:(1) DlUGD6基因的cDNA序列全长1 860 bp,包含开放阅读框1 443 bp,编码480个氨基酸(GenBank登录号KU198438);生物信息学分析显示,DlUGD6属于稳定的酸性亲水蛋白,不含信号肽,具有跨膜结构和3个典型的保守结构域,属于UDP-葡萄糖/GDP-甘露糖脱氢酶家族;进化树分析表明,DlUGD6与柑橘亲缘关系较近.(2)洋葱内表皮GFP荧光定位观察发现,DlUGD6定位于细胞质;qRT-PCR结果显示,DlUGD6在龙眼非胚性愈伤组织中表达量相对较高,且在其他体胚发育阶段也均有稳定表达;在合子胚发育中子叶胚形成后第8天(S3)和第24天(S7)时表达量最高,整体呈“W”型;在不同组织器官中,DlUGD6在花药和茎中的表达量最高,且整体上生殖器官中的表达水平高于营养器官.研究认为,DlUGD6基因可能参与龙眼生长发育各个阶段中细胞壁多糖合成.
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关键词
龙眼尿苷二磷酸葡萄糖6-脱氢酶基因克隆亚细胞定位qRT-PCRDimocarpus longan Lour.DlUGD6gene cloningsubcellular localizationqRT-PCR
栏目名称
研究报告
DOI
10.7606/j.issn.1000-4025.2017.04.0636
发布时间
2017-07-31
基金项目
国家自然科学基金
福建省重大科技专项
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