换一批'云香'水仙NtWRKYY2基因的克隆及功能分析
Cloning and Functional Analysis of NtWRKYY2 Gene from Narcissus tazetta var.'Yunxiang'
摘要以'云香'水仙为材料,采用PCR技术分离中国水仙WRKY转录因子家族成员NtWRKYY2(GenBank登录号为KX056496),其开放阅读框(ORF)长度为867 bp,编码289个氨基酸.氨基酸序列比对及系统进化树分析显示,NtWRKYY2编码蛋白含1个WRKY结构域和C2H2锌指结构(Csx4Cx23HxH),属于第Ⅱd类WRKY转录因子.实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析显示,NtWRKYY2在'云香'水仙应对盐胁迫中显著上调表达.利用In-Fusion克隆技术成功构建过表达载体pMDC140-NtWRKYY2,并采用农杆菌介导叶盘法转化烟草,获得11株卡那霉素抗性植株,转化子进一步PCR检测结果显示,其中有8株目的基因已成功导入烟草基因组中,转化率为72%.盐胁迫处理和叶绿素荧光参数分析显示,盐胁迫处理后NtWRKYY2过表达的转基因烟草萎蔫和黄化程度小于野生型植株,Fv/Fm值下降幅度小于野生型植株.研究表明,NtWRKYY2过表达的转基因烟草具有抵抗盐胁迫的能力.该研究为水仙抗盐转基因育种提供备选目的基因.
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栏目名称
DOI
10.7606/j.issn.1000-4025.2017.07.1255
发布时间
2017-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
福建省种业创新与产业化工程项目（(K8114001B)）
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