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发菜G6PDH基因(GND)克隆及其干旱胁迫下的差异表达分析

Clone of G6PDH Gene (GND) from Nostoc flagelliforme and Differential Expression under Drought Stress

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摘要由GND编码的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)是戊糖磷酸途径的关键酶.为了解发菜GND分子信息以及对干旱胁迫的响应机制,该研究设计了特异性引物克隆发菜GND全长,进行序列分析、原核表达和MALDI-TOF-TOF/MS鉴定,并对干旱胁迫下发菜GND的差异表达水平和G6PDH活性进行分析.结果表明:(1)发菜GND全长1 431 bp(GenBank登录号为KX553955),与点形念珠藻(73102)的GND核苷酸序列相似性为96%,G6PDH氨基酸相似性为98%;氨基酸序列中第26和27位的Ile疏水性最强,在第302位的Arg亲水性最强,Thr有19个磷酸化位点,Ser有18个磷酸化位点,Tys有5个磷酸化位点,二级结构和三级结构主要由α螺旋、β折叠、β转角和随机卷曲构成.(2)将GND基因进行原核表达,获得47.23 kD的外源表达蛋白G6PDH.(3)随干旱胁迫程度加剧,GND在转录水平的表达量和G6PDH活性均逐渐增加.研究结果为进一步探讨干旱胁迫条件下发菜GND表达调控奠定了基础.

作者刘阳 ^[1] 严奉坤 ^[2] 丁苗苗 ^[1] 李晓旭 ^[1] 王玲霞 ^[3] 岳思君 ^[1] 梁文裕 ^[4] 学术成果认领

作者单位宁夏大学生命科学学院,银川,750021 ^[1] 宁夏大学农学院,银川,750021 ^[2] 宁夏大学生命科学学院, 银川 750021;宁夏大学农学院, 银川 750021 ^[3] 宁夏大学生命科学学院, 银川 750021;西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室, 银川 750021 ^[4]

关键词发菜葡萄糖-6-磷酸脱氢酶克隆差异表达 Nostoc flagelliforme glucose 6-phosphate dehydrogenase (G6PDH)gene clone differential expression

医学主题词干旱(Droughts)基因(Genes)葡萄糖(Glucose)性(Sex)研究设计(Research Design)

分类号 Q785（分子生物学基因工程《遗传工程》）Q786（分子生物学基因工程《遗传工程》）Q945.78（植物生理学）

栏目名称

研究报告

DOI 10.7606/j.issn.1000-4025.2017.07.1263

发布时间 2017-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

基金项目

国家自然科学基金（31660066）国家自然科学基金（31360054）国家自然科学基金（31360025）宁夏回族自治区自然科学基金（NZ1608）