积雪草主要三萜类化合物测定方法的优化研究
Optimization of methods for determining major triterpenoid compounds in Centella asiatica(L.)Urban
摘要[目的]建立以环糊精为流动相添加剂的高效液相色谱法测定积雪草药材中三萜类化合物积雪草苷、羟基积雪草苷和积雪草苷B的含量,为控制积雪草的质量提供依据.[方法]采用分子设计方法优选流动相添加剂-环糊精种类,效应面法分析环糊精浓度、流动相中乙腈的比例、流动相pH对分离的影响,优化色谱条件,测定积雪草中积雪草苷、羟基积雪草苷和积雪草苷B含量.[结果]优化后HPLC色谱测定方法以γ-环糊精为流动相添加剂,固定相为CAPCELL PAK C18柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-3 mmol/L环糊精溶液(含0.10%磷酸)=20∶80(V/V),流速1.0 mL/min,柱温25 ℃,检测波长205 nm;羟基积雪草苷和积雪草苷B分离度为4.32;积雪草苷为200~2 000 ng,积雪草苷B为120~1 200 ng,羟基积雪草苷为200~2000 ng内线性关系良好,方法精密度、重现性、稳定性和回收率良好.[结论]新HPLC色谱测定方法简便、准确、可靠,且经济环保,可用于测定积雪草药材中主要三萜类化合物.
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