换一批
换一批反义HPV16 E6/E7-EGFP重组质粒的构建及其对宫颈癌SiHa细胞的促凋亡作用
Construction of EGFP-labled recombinant plasmid of antisense RNA targeted to human papillomavirus16 E6/E7 gene and its effect on apoptosis of SiHa cervical carcinoma cells
摘要目的:构建HPV16早期基因E6/E7的反义重组质粒,探讨其对SiHa细胞的促凋亡作用.方法:将HPV16 E6/E7基因片段反向克隆于真核表达载体pEGFP-C1并转染SiHa细胞,用RT-PCR方法检测转染后SiHa细胞E6、E7基因mRNA的表达,Western blot方法检测转染后E6/E7蛋白的表达,流式细胞仪检测转染后细胞的凋亡率.结果:成功构建携带HPV16 E6/E7基因反义片段的真核表达载体,转染该质粒后,SiHa细胞E6、E7基因的mRNA和蛋白均明显下调;转染后细胞凋亡率为(59.3±11.3)%,明显高于转染空载体组[(9.4±1.8)%]和未转染组[(2.1±0.4)%](P＜0.05).结论:反义HPV16 E6/E7基因可下调宫颈癌细胞中E6/E7癌基因的表达,诱导宫颈癌细胞凋亡,为宫颈癌的基因治疗提供了实验依据.
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分类号
R737.33
栏目名称
论著
DOI
10.3969/j.issn.1004-7379.2006.12.002
发布时间
2007-03-13
基金项目
国家重点基础研究发展计划(973计划)
国家自然科学基金
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