AD-hTERT-3E-EGFP-IRES-ELA构建及其对卵巢癌细胞体外抑制作用的研究

Construction of AD-hTERT-3E-EGFP-IRES-ELA and its inhibitory effect on ovarian cancer cells in vitro

摘要目的:构建溶瘤腺病毒载体系统AD-hTERT-3E-EGFP-IRES-ELA,观察AD-hTERT-3E-EGFP-IRES-ELA在卵巢癌SKOV3细胞中的表达及对SKOV3细胞的体外杀伤、抑制迁移的作用.方法:利用基因重组技术构建腺病毒AD-hTERT-3E-EGFP-IRES-ELA.使用OLYMPUS共聚焦显微镜系统,观察EGFP在SKOV3细胞中的表达情况.通过MTS、流式细胞仪检测AD-hTERT-3E-EGFP-IRES-ELA对SKOV3细胞的杀伤效果及作用方式.通过划痕实验、Transwell检测重组病毒对SKOV3细胞体外迁移的作用.结果:成功构建AD-hTERT-3E-EGFP-IRES-ELA.AD-hTERT-3E-EGFP-IRES-ELA在卵巢癌细胞(SKOV3)中可表达EGFP,其荧光强度随时间增加而增强.AD-hTERT-3E-EGFP-IRES-ELA对卵巢癌细胞具有杀伤效果(P<0.05)及抑制细胞迁移的特性(P<0.05),主要作用是导致SKOV3细胞出现早期凋亡.结论:成功构建了一种新型的肿瘤特异的溶瘤腺病毒载体系统AD-hTERT-3E-EGFP-IRES-ELA,其在体外对卵巢癌细胞具有杀伤及抑制肿瘤迁的作用.